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Product Center當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心實驗技術(shù)服務(wù)動物模型構(gòu)建腦缺血再灌注動物模型
上海申知心致力于臨床前藥效學(xué)CRO實驗,多年的腦缺血再灌注模型的構(gòu)建,為廣大藥效學(xué)實驗提供保障??砷_展腦缺血再灌注模型的構(gòu)建。
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相關(guān)文章局灶性腦缺血/再灌注損傷模型造模方案:
禁食12h(不禁水)左右的SD大鼠麻醉后取仰臥位,去除頸前被毛、常規(guī)消毒后,頸部正中切口,仔細(xì)分離左側(cè)的頸總動脈(CCA),避免損傷迷走神經(jīng)及頸交感干,并向上分離出頸外動脈(ECA)和頸內(nèi)動脈(ICA)。在距離CCA分叉較遠(yuǎn)處用醫(yī)用縫合線結(jié)扎CCA和ECA,將CCA和ICA拉成一直線,用*脈夾暫時阻斷ICA血流,在CCA血管壁上剪一小口,把粗細(xì)適中的線栓自CCA切口插入,沿著CCA分叉處緩慢插入ICA,遇有輕微阻力即停止,此時線栓的膨大頂端即堵塞大腦中動脈的開口,在用縫合線固定住線栓,常規(guī)消毒后全層縫合皮膚切口。假手術(shù)組動物手術(shù)步驟類似,但未作線栓閉塞中動脈。造模后的大鼠輕輕的轉(zhuǎn)移到鼠籠里,平躺在適溫墊料上以保持大鼠正常體溫。
栓塞2h后緩慢拔出一部分線栓,使線栓頂端不再閉塞中動脈,讓缺血側(cè)腦部血液再灌注。再灌注1h后對大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能評分,屏風(fēng)方法按照Longa法神經(jīng)行為缺損評分標(biāo)準(zhǔn):沒有神經(jīng)損傷計為0分;不能伸出左前爪(輕微神經(jīng)損傷)記為1分;向左繞圈(中度神經(jīng)損傷)記為2分;向左邊傾斜(重度神經(jīng)損傷)記為3分;不能自主行走或失去知覺記為4分。神經(jīng)功能缺損評分在2~3分視為模型成功。
分子實驗平臺:高效運(yùn)作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構(gòu)建、流式細(xì)胞儀檢測、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實驗、酶聯(lián)免疫吸附測定、外泌體抽提及鑒定等實驗。
基因組學(xué)平臺:可以完成甲基化檢測、基因芯片分析、高通量測序等實驗。
蛋白組學(xué)平臺:能實現(xiàn)LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點(diǎn)實驗項目。
病理學(xué)平臺:涉及免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色、HE染色、特殊染色等實驗。
臨床前CRO服務(wù):主要提供呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)性疾病的藥效學(xué)評價服務(wù),包括靶點(diǎn)驗證、體內(nèi)外模型的構(gòu)建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評價、藥代動力學(xué)和藥理學(xué)研究以及院內(nèi)制劑研發(fā)等。
項目轉(zhuǎn)化服務(wù):助力客戶進(jìn)行方案設(shè)計、聯(lián)合課題申報、藥物項目引進(jìn)和孵化,解決客戶對實驗技術(shù)平臺、專業(yè)人和融資的需求;